抗生素对每个人来说并不陌生。 抗生素作为一种抗炎药，广泛应用于各种疾病的治疗，但滥用的危害检测显而易见的； 发现了高浓度的抗生素。 这些抗生素大部分通过医疗废水、生活污水、养殖废水、兽药、饲料等排入地表水，部分通过饮用水进入人体。 这也是近年来出台多项水体抗生素检测标准的原因。
今天，我们就来说说液相色谱-三重四极杆质谱法检测水中抗生素的方法。 该方法的检测原理是将采集的水质样品经0.22pm滤膜过滤，与乙腈1:1混合，液相色谱-三重四极杆质谱仪测定。 以保留时间和特征离子定性，外标法定量。
一、检测所用试剂：
1、乙腈：色谱纯。
2、甲酸：色谱纯。
4.50%乙腈溶液：取50ml乙腈，用水稀释至100ml。
5.0.1%甲酸水溶液：取1ml甲酸，用水稀释至。
6、标准品：红霉素，含量≥97.0%； 青霉素，含量≥98.0%。
7、红霉素标准储备液浓度为100ug/ml。 准确称取10.0 mg红霉素标准品，用乙腈溶解并稀释，配成浓度为100ug/ml的标准储备液； 也可直接购买经认证的标准溶液，冷冻于-10℃以下，避光保存； 或参考制造商的产品保存说明，使用前恢复至室温并摇匀。
8、青霉素标准储备液浓度为100ug/ml。 准确称取10.0 mg青霉素标准品，用50%乙腈溶液溶解并稀释，配成浓度为100ug/ml的标准储备液； 也可直接购买经认证的标准溶液，冷冻于-10℃以下，避光保存； 或参考制造商的说明 保存产品手册，恢复至室温并在使用前摇匀。
9、红霉素青霉素混合标准溶液：浓度为10.0ug/ml。 取红霉素和青霉素标准储备液1.00 ml于10.0 ml容量瓶中，用50%乙腈溶液稀释至刻度，即得红霉素和青霉素混合标准溶液。
10. 膜：一次性针头过滤器，0.22um，混合纤维素酯（MCE）材料。
11、一次性聚丙烯针管。
2.检测用仪器：
1、液相色谱-三重四极质谱仪：配备电喷雾电离源（ESI），具有梯度洗脱和多重反应监测功能。
2、分析天平：感量为0.0001g。
3、样品瓶：100ml磨口或琥珀色玻璃瓶，内衬聚四氟乙烯瓶盖。
4. 微量注射器或移液器：10ul、50ul、100ul、500ul、1.0ml。
3. 水样的采集和制备：
我们可以按照相关规定采集水质样本。 采集水样时，样品瓶应装满，不能有空隙。 冷藏在 4°C 以下并避光。 分析在 2 天内完成。
四、水样的制备：
水样应充分混合，取约10ml样品，用0.22um滤膜过滤。 弃去至少1ml的初滤液后，从棕色取样瓶中准确取出500ul过滤后的样品，再加入500ul乙腈进行检测。
准备空白水样。 用实验室级纯水代替水样，然后按水样制备步骤操作空白水样。
五检测步骤：
1、液相色谱条件：
色谱柱为C18（.1mm，粒径1.7um），或同等产品； 流动相A：乙腈，B：0.1%甲酸水溶液； 流速为0.25ml/min； 柱温为30℃； 进样量为10ul； 流动相梯度洗脱程序
2、质谱条件：
离子源为电喷雾离子源（ESI）； 扫描方式为正离子方式； 监测方法为多反应监测（MRM）； 脱溶剂气、锥孔气、碰撞气均为高纯氮气或其他合适的气体。
3、建立标准曲线：
取红霉素和青霉素混合标准溶液适量，用50%乙腈溶液稀释，配制成至少5个浓度点的系列标准溶液。 标准溶液中红霉素和青霉素的参考浓度分别为0.100ug/L、0.200ug/L、0.500ug/L、1.00ug/L、2.00ug/L、5.00ug/L、10.0ug/L和20.0ug/L L. 按照规定的仪器条件，将标准系列溶液从低浓度到高浓度依次测定。 以目标化合物的质量浓度(ug/L)为横坐标，相应的响应值为纵坐标，建立标准曲线。
6、水样的测定：
按照规定的仪器条件对配制好的水样进行测定。 定性分析可以在相同的色谱/质谱条件下测量标准溶液和样品。 根据标准溶液色谱图的保留时间和样品的保留时间，标准溶液各色谱峰的特征离子与样品各色谱峰的特征离子相对定性。 样品与标准品保留时间的相对偏差不大于5%。 样品中目标化合物定性离子的相对丰度 (Ksam)。 与相似浓度标准溶液中相应定性离子的相对丰度（Kskd）比较，如果相对丰度偏差不超过相关图表规定的范围，则可以判断该化合物中存在相应的目标化合物。样本。 根据公式可直接计算出水样中红霉素和青霉素的质量浓度。
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